Merkt iemand die altijd .mp3 gewend is het verschil met .flac?

Zonder het daadwerkelijk te vergelijken niet. Wordt het achter elkaar afgespeelt en wordt er gevraagd erop te letten kan je het verschil horen.

Zonder aankondiging ; moeilijk.

Tja, hangt van verschillende factoren af. Heeft hij goeie oren? Draait de muziek op een goede speakerset en vaak erg hard? Dan merk je wel verschil met .flac en .mp3. Als je rustig als achtergrondmuziek luistert dan is het nauwelijks te horen.

Omdat een .flac bestand bij de compressie geen audio-informatie kwijt raakt is theoretisch een iets betere geluidskwaliteit te verwachten.
Bij compressie naar .mp3 bestanden wordt de audio-informatie die geen hoorbare invloed op de rest van het geluid heeft weggelaten.

Van wikipedia nog even de uitgebreide uitleg:

"FLAC (Free Lossless Audio Codec) is een compressietechniek om audio op te slaan. Dit wordt gedaan zonder enige vorm van gegevensverlies (lossless). Het verschil met MP3 is dat de compressietechniek van MP3 wel gegevens opoffert (lossy), zodat een MP3-bestand dat terug omgezet wordt in een WAV-bestand iets aan kwaliteit verliest ten opzichte van het origineel; hoe groter de compressie, hoe hoger het kwaliteitsverlies. Dit is niet zo bij FLAC: na "decompressie" verkrijgt men een exacte kopie van het oorspronkelijke bestand. Een FLAC-bestand is hierdoor minder compact dan een als MP3 of met een andere lossy methode gecodeerd bestand."

Nee mp3 haalt namelijk tonen weg die we sowieso niet horen

Ja, je kan het horen. Ik kreeg bij mp3 een soort heel lichte 'ruis' in mijn hoofd, en bij flac klonk het geluid duidelijk veel voller, het is completer en meer geaard, zogezegd.
dat verschil was duidelijk, we hebben testjes gedaan hier in de huiskamer (wel met ontzettend goede Zweedse speakers, dankzij mijn vriend de geluidsfreak :) ) en hij liet in willekeurige volgorde flac en mp3 afspelen. Het verschil haalde je er goed uit.

Zal ook wel van de "soort" muziek afhangen.
Ik hoor het zeker.
Maar niet b.v. in de auto. :)